Sisu
Gram-plekk ehk lihtsalt Gram on kiire ja lihtne tehnika, mille eesmärk on bakterite eristamine vastavalt nende rakuseina omadustele pärast kokkupuudet erinevate värvainete ja lahustega.
Seega on Gram-värvimise abil võimalik lisaks bakterite kujule kontrollida ka nende omandatavat värvi ning see tulemus on oluline bakteriliigi tuvastamise muude strateegiate määratlemiseks ja arsti poolt ennetava ravi määramiseks vastavalt mikroskoopiliselt täheldatud omadused.
Grammiga värvimist tehakse tavaliselt laboris rutiinselt ja see on osa bakterioskoopia eksamist. Saage aru, mis on bakterioskoopia ja kuidas seda tehakse.
Kuidas Grami plekki tehakse
Grammiplekk on kiire, praktiline ja odav meetod nakkuste eest vastutavate bakterite kindlakstegemiseks, mis on arstidele kasulik võimaliku infektsiooni ennetava ravi näitamiseks, kuna on teada nende bakterirühmade spetsiifilised omadused.
Grammi värvimine toimub 7 põhietapina, kuid protokoll võib laborist sõltuvalt erineda:
- Asetage mõned bakterikolooniad slaidile, lisades kolonni homogeniseerimise hõlbustamiseks tilga vett;
- Laske sellel veidi kuivada ja tera saab kuivamise soodustamiseks leegist kiiresti läbi minna, kuid siiski on oluline pöörata tähelepanu temperatuurile, kuna liiga kõrge temperatuuri korral on võimalik, et bakterite struktuur muutub, mis võib tulemust segada eksam;
- Kui slaid on kuivanud, katke violetse kristallvärviga ja laske sellel toimida umbes 1 minut;
- Peske slaidi voolava veejoaga ja katke slaid lugooliga, mille eesmärk on sinise värvi kinnitamine, ja laske sellel 1 minut toimida. Mõlemat tüüpi bakterid suudavad absorbeerida värvaine ja lugoli moodustunud kompleksi, muutudes siniseks;
- Seejärel peske slaidi jooksva veega ja lisage 95% alkoholi, lastes sellel 30 sekundit toimida. Alkohol vastutab gramnegatiivseid baktereid moodustava lipiidmembraani lahustamise eest ja seega värvi ja lugoli vahel moodustunud kompleksi eemaldamise eest, muutes nende bakterite värvi. Grampositiivsete bakterite korral dehüdreerib alkohol grampositiivsete bakterite rakuseina, põhjustades pooride kokkutõmbumist ja muutes need läbitungimatuks;
- Seejärel peske uuesti voolavas vees ja katke slaid teise värvaine, fuksiini või safraniiniga ja laske sellel toimida 30 sekundit;
- Seejärel peske slaidi jooksva vee all ja laske toatemperatuuril kuivada.
Niipea kui objektiklaas on kuivanud, on võimalik panna tilk kastmisõli ja jälgida mikroskoobi all olevat objektiivi 100x objektiiviga, kontrollides nii bakterite olemasolu kui ka pärmseente ja epiteelirakkude olemasolu.
Milleks see on mõeldud
Grammiga värvimise peamine eesmärk on bakterite eristamine vastavalt rakuseina omadustele ja üldisele morfoloogiale. Seega võib mikroskoobi all vaadeldud omaduste järgi bakterid liigitada:
- Grampositiivsed bakterid, mida visualiseeritakse sinise värvusega, kuna alkohol ei värvita neid, kuna neil on paksem rakusein ja poorid kitsenevad kokkupuutel lugooliga;
- Gramnegatiivsed bakterid, mis on visualiseeritud roosa / lillaka värvusega, kuna alkohol muudab nende värvi ja safraniin või fukssiin värvivad neid.
Pärast bakterite visualiseerimist mikroskoobi all on võimalik, et bakteriliigi tuvastamiseks tehakse laboris täiendavaid katseid. Kuid läbi grammi ja seose inimese poolt ilmnenud märkide ja sümptomitega saab arst näidata ennetavat ravi, kuni täpsemate testide tulemused on kättesaadavad, sest nii on võimalik vähendada bakterite replikatsiooni määra ja vältida tüsistusi.